全身性基因敲除
全身性基因敲除小鼠是研究基因在动物体内功能的基础技术,其在生物医学研究中有广泛的应用,本公司可提供快速成熟的全身性基因敲除小鼠制作服务。
常规的基因敲除步骤如下:应用基因编辑技术对靶位点DNA进行切割,引发DNA双链断裂,诱发非同源末端连接修复DNA,在此过程中往往会产生DNA的插入或删除,造成移码突变,打乱原基因读码框,致使该基因功能丧失,从而实现基因敲除。全身性基因敲除技术应用的前提是该靶基因的缺失不会导致胚胎致死。
图:基因敲除示意图
1.1. 特定区域敲除
在生物体内,同一个基因的不同转录本可能编码多个同源蛋白异构体(isoform),而不同的isoform的功能可能有所不同,为研究靶基因特定isoform在体内的功能和相关表型,往往需要特异性敲除其转录本。通过对基因的特定区域进行敲除,从而实现破坏其特异性转录本的目的。
1.2. 长链非编码RNA敲除(lncRNA)
长链非编码RNA(lncRNA)指的是长度在200nt以上、不编码蛋白、但参与细胞内多种生物学过程的RNA分子。大量研究提示着非编码区域可能通过表达lncRNA,活跃地参与到生物学功能的调控中。由于大多数长链非编码RNA在物种之间没有明显的序列保守性,对lncRNA进行碱基替换、插入或缺失部分序列时仍能表现出其原有的生物学活性,因此lncRNA功能的缺失需要通过对这段保守的区域的精准敲除来完成。
本公司可根据客户需求,定制特定区域敲除/非编码RNA敲除(lncRNA)基因工程鼠。