慢性病毒包装服务
     
          慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷1型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。它能高效的将目的基因（或RNAi）导入动物和人的原代细胞或细胞系。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点。慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。

 服务优势

1）第三代慢病毒包装系统，安全性更高
2）17000个现货cDNA克隆可在2-3天由穿梭载体克隆至慢病毒载体,2周即可交付慢病毒
3）多种慢病毒载体可供选择，C-端或N-端带有荧光标记（GFP、RFP)和亲和标签
4）可根据客户要求提供不同滴度（高或低）的慢病毒产品
5）严格的质量控制：基因特异引物检测、Real-time PCR病毒滴度测定
6）可将您感兴趣的任何基因克隆至我们的慢病毒载体进行慢病毒生产
7）可提供从慢病毒载体构建、慢病毒包装到稳转细胞系构建一站式服务

 

服务流程



 
服务周期

技术内容 周期 交付内容
gRNA 设计及合成   1~2周 1）3个gRNA构建
2）测序报告
3）质粒结构图谱
4）质检报告
5）10ug/载体研究级别质粒
载体构建 克隆至需求载体
质粒测序
质粒制备
病毒制备(针对慢病毒载体) 2~3 周 1）单克隆细胞株
2）gRNA靶点序列及目标区域测序报告
3）质检报告
转染 稳定转染
病毒侵染
FACS分选
单克隆制备及细胞建库 单克隆制备 5~8 周
PCR鉴定
测序分析
细胞建库
鉴定(可选) qPCR 2~3 周
Western Blot

 

应用案例
Fig. 质粒测序峰图​ 

Fig. 质粒测序结果分析

 
Fig. 细胞上清支原体检测结果

Fig. 待转染质粒鉴定结果

Fig. GFP融合标签的过表达慢病毒产品感染目标细胞