单抗基因钓取及测序分析服务
杂交瘤细胞培养是单抗制备的重要途径，传统培养基需要加入血清，易造成批次间差异和培养体系的不稳定，且存在一定的污染风险。无血清培养驯化去除培养基中血清成分对后续抗体质量有利。细胞驯化即是通过生产或检测用细胞的培养条件或培养环境经过一定适应性改变，驯化为满足生产或检测需求的培养条件。驯化成功的杂交瘤细胞通过转瓶培养大规模制备不含有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig)和动物病毒的单克隆抗体。
杂交瘤测序技术即为杂交瘤细胞抗体基因提取，是通过提取杂交瘤细胞株中的总mRNA，并反转录获得cDNA，利用RACE或者物种亚型特异性简并引物扩增获取可变区序列，从而获得杂交瘤单克隆细胞株的抗体基因信息，该技术是建立抗体的指纹密码、知识产权保护或者基因工程抗体表达的前提。其应用价值在于：①为申请保护性专利提供有权单抗序列信息；②保留单克隆抗体序列信息，防止杂交瘤细胞丢失单抗信息；③帮助目标细胞株的选择，表达纯度更高的重组单克隆抗体；④缩短杂交瘤细胞克隆化耗时过程，加速单克隆抗体产生速度；⑤构建嵌合抗体或人源化抗体。
服务优势
1）拥有成熟的细胞驯化工艺平台，已经成功驯化过多个杂交瘤细胞单克隆抗体株；
2）拥有成熟的无血清细胞上清生产线，可以制备从毫克到克级的单克隆抗体；
3）抗体生产程序严格按照GMP标准执行；
4）严格保密客户的细胞系、抗体等项目信息；
5）经过多次验证的杂交瘤测序引物，每一步骤严格采用高保真酶进行扩增，保证序列与天然抗体一致性，具有极高的成功率与快速交付速度；
6）完备的生物信息学分析，去除冗余序列信息，追踪确保研发和生产计划中的批次一致性；
7）多轮亚克隆细胞后，鉴定细胞单抗亚型，从中挑取3-5株，提取杂交瘤细胞抗体基因；
8）可提供从杂交瘤亚克隆、杂交瘤测序到抗体表达及验证一站式服务，可根据您的需求进行选择。
服务流程
服务周期
| 服务流程 | 周期 | 交付内容 |
| 细胞驯化 | 2~3周 |
1.无血清杂交瘤细胞株 2.无血清细胞上清 3.纯化抗体 4.抗体QC验证报告 |
| 无血清上清抗体生产 | 3~4周 | |
| 抗体纯化及验证 | 3~4周 | |
| 杂交瘤亚克隆（可选） | 3-6周 | |
| RNA提取 |
1.抗体重链及轻链序列 2.分别含有抗体重链、轻链的商业表达载体 3.详实的实验报告和鉴定/验证报告 4. 完全的知识产权 5. 实验报告 |
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| 反转录 | ||
| PCR 扩增重链及轻链序列 | ||
| 测序验证 | ||
| 载体构建 | ||
| 小试表达分析及ELISA验证（可选） | 2周 |
注：①客户需提供数量>1×107的杂交瘤细胞；如需小试表达，需提供靶标抗原
应用案例
Fig 1. 杂交瘤细胞总RNA(A) 和抗体可变区基因扩增(B)
Fig 2. 重链可变区基因测序部分结果
Fig 3. 轻链可变区基因部分测序结果
Fig 4. 不同序列重链轻链配对表达结果