产品名称:2×Taq PCR 预混试剂Ⅱ(含染料)

产品编号:BLGE181-5ML

产品规格:5ML
产品组成
产品货号
BLGE181-5ML
2×Taq PCR MasterMix Ⅱ 5×1 ml
Loading dye in MasterMix Ⅱ  
ddH2O 5 ml

说明书


产品情况:本产品含有高纯度的Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂和优化剂以及稳定剂,为2倍浓度的即用型PCR预混试剂。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、扩增效率高、稳定性好等优点,可减少人为误差、节约操作时间、降低污染几率。
本产品不同批次之间误差很小,适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测;也适用于常规PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等;特别适合于较长片段(≤5 kb)的扩增和一些有特殊结构的复杂模板如GC含量较高(60%<GC≤70%),有二级结构等DNA扩增;本产品无外源核酸酶活性,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;本产品PCR产物带A,纯化后可直接用T/A载体克隆。
 
储存运输:冰袋运输;
室温(15~25℃)可存放一周;如需经常使用,可存放于4℃;-20℃可长期保存,多次冻融不影响活性。

注意事项:
(一)冻存的2×Taq PCR MasterMix Ⅱ需提前置于冰上解冻,若经常使用可于4℃保存;
(二)PCR反应体系需在冰上进行配制;
(三)PCR反应程序设置时,退火温度可根据反应体系中引物的Tm值进行适当调整;
(四)操作时请做好个人防护,穿实验服并佩戴一次性手套。
 
实验流程:
本产品使用时取适量2×Taq PCR MasterMix Ⅱ溶液,加入模板和引物,并加入ddH2O水补足体积,使MasterMix Ⅱ溶液的浓度为1×即可进行反应。
(一)PCR反应体系(以下举例仅供参考):
组成成分 体积 终浓度
Template < 1 µg -
Primer F (10 µM) 0.5 µl 0.25µM
Primer R (10 µM) 0.5 µl 0.25µM
2×Taq PCR MasterMix Ⅱ 10 µl
ddH2O 补至20 µl -
 
注:以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段,反应体系为20 µl(如反应体系不同,可按此比例增加或减少用量)。
(二)PCR反应程序(以下举例仅供参考):
温度 反应时间 循环数
94℃ 3 min 1
94℃ 30 sec 30~35
58℃ 30 sec
72℃ 1 min/kb
72℃ 5 min 1
4℃ holding 1
 
(三)结果检测
产品已添加染料,为蓝色,反应结束后直接取6 µl反应产物上样,进行琼脂糖凝胶电泳检测;根据上样孔大小可适当调整上样量。
 
本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断!