产品名称:ECL超灵敏化学发光检测试剂盒(飞克级)
产品编号:BLWB021
产品规格:
产品组成 | BLWB021-100ML | BLWB021-250ML |
ECL FemtoLight Substrate | 100 mL | 250 mL |
ECL FemtoLight Oxidant | 100 mL | 250 mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
说明书 |
产品情况:ECL超灵敏化学发光检测试剂盒是一款非放射性的化学发光系统,可用于检测结合到膜上的蛋白所偶联的辣根过氧化物酶 (HRP) 的活性。本产品包括增强的鲁米诺底物和稳定的过氧化物体系,能检测低至飞克级的微量蛋白,适用于常规Western Blot的化学发光。
ECL化学发光试剂盒分BLWB016 ECL基础化学发光试剂盒和BLWB021 超敏ECL化学发光试剂盒。对于丰度较高的目的蛋白检测,例如内参蛋白等,推荐使用BLWB016,该产品可检测低至皮克量的蛋白;而对于低丰度较难检测的目的蛋白,推荐使用BLWB021,该产品可检测到低至飞克量的蛋白,且发光更稳定。
储存运输:冰袋运输;
2-8℃避光保存,保质期 12个月;
如果长期不用,可以-20℃保存。
注意事项:
(一)100 mL 规格可供1000cm2的转印膜使用;
(二)ECL FemtoLight Substrate和ECL FemtoLight Oxidant在吸取过程中必须要更换吸头,相互污染后会导致底物和过氧化物逐渐失效;
(三)金属离子的污染会降低本试剂的灵敏度,请注意用干净吸头;
(四)NaN3会抑制HRP的活性,因此二抗的保存或回收应避免使用NaN3;
(五)ECL FemtoLight Substrat及发光工作液应避免强光照射,强光照射会导致灵敏度降低;
(六)ECL发光液灵敏度很高,如果出现背景升高的现象,可能是使用的一抗或二抗浓度过高会造成;
(七)如果荧光迅速淬灭,可能原因是目的条带荧光过强,导致HRP迅速消耗ECL;
(八)如果没有发光信号,可能是目的蛋白表达很弱,可延长压片时间;
(九)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验流程:
(一) 从洗涤缓冲液中取出转印膜,沥去多余的液体,保持膜处于湿润状态;
(二) 等体积混匀 ECL FemtoLight Substrate 和 Oxidant ,配制化学发光工作液(每平方厘米的转印膜约需0.1 mL的工作液),现配现用,2天内使用;
(三) 将化学发光液均匀滴到膜上,反应1-2 min。如要检测的蛋白信号很高时,请尽量不要让化学发光工作液处于静止状态,可将加了工作液的膜置于摇床上混动1-2 min,以避免局部的反应物过度消耗,影响检测信号的线性范围;
(四) 取出膜,沥去多余的发光工作液,将膜包裹于透明的保护夹中;
(五) X光片曝光:在暗室中将膜对X光片曝光。曝光时间从几秒到几分钟不等;将底片显影,如有必要,可根据显影结果调整曝光时间进行第二次曝光;
CCD成像仪:无需将膜置于保护夹中,可直接用于拍照,拍照按仪器使用说明进行;
(六) 使用过的膜可剥离抗体后进行多次杂交。
本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断!