产品编号：BLRE158

产品规格：

产品组成	BLRE158-100T	BLRE158-500T
细胞染色缓冲液	100 mL	500 mL
Hoechst 染色液	0.5 mL	2.5 mL
PI 染色液	0.5 mL	2.5 mL
说明书	1份	1份

产品情况：细胞发生凋亡时，染色质会固缩。Hoechst33342可以穿透细胞膜，染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶（PI）不能穿透细胞膜，对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性丧失，碘化丙啶（PI）可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时，正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光，凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光，坏死细胞为强红色荧光＋强蓝色荧光。
本产品细胞凋亡荧光Hoechst 33342 / PI双染试剂盒是一种经典而又快速简便的细胞凋亡与细胞坏死检测试剂盒。染色快速方便，两种染料的染色仅需20-30分钟，一步染色即可完成。使用方便，使用流式细胞仪检测时，无需稀释等配制过程，也无需再准备其它任何溶液。本试剂盒足够检测100个样品，每个样品的细胞数量可以为 1×10⁵~1×10⁶个。
本试剂盒适用于流式细胞仪或荧光显微镜检测。

储存运输：4℃可有效保存6个月，-20℃可有效保存12个月。Hoechst 33342 / PI染色液需避光保存。

注意事项：
（一）荧光染料存在猝灭，Hoechst 33342 / PI染色液染色后宜尽快检测；
（二）Hoechst 33342染色液对人体有害，碘化丙啶(PI)对人体有刺激性，请注意适当防护；
（三）实验过程中请穿实验服并戴一次性手套，避免污染，确保安全。


使用方法：
（一）每个样品收集约 1×10⁵~1×10⁶个细胞于 1.5mL离心管内，离心弃上清；细胞沉淀用0.8~1mL细胞染色缓冲液重悬；
（二）加入5μL Hoechst 33342染色液；
（三）加入5μL PI染色液；
（四）混匀，冰浴或4℃孵育20-30分钟；

实验结果分析：
（一）对于流式细胞仪
检测蓝色荧光和红色荧光；Hoechst 33342最大激发波长为346 nm，最大发射波长为460 nm；Hoechst 33342-DNA复合物的最大激发波长为350 nm，最大发射波长为461 nm；PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm，最大发射波长为615 nm。
（二）对于荧光显微镜
1.悬浮细胞：检测前离心沉淀细胞，用PBS洗涤一次，再涂片观察红色荧光和蓝色荧光；
2.贴壁细胞：可以不收集细胞，直接依次按照上述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst 染色液和PI染色液，冰浴或4℃染色20-30分钟。染色后PBS 洗涤一次，再在荧光显微镜下观察。

本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断！